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CONTROL DE LA REPLICACION EN Escherichia coli
Personal
Elena
Guzmán
Cabañas
Emilia
Botello
Cambero
Felipe Molina
Rodríguez
Encarna
Ferrera
Guillén
Belén
Mendoza
Chamizo
Proyectos
recientes
Amplificación Genómica Controlada por
Temperatura
(AGCT). Estudios de la activación térmica de la
replicación cromosómica. Junta de Extremadura, I
Plan Regional de Investigación y Desarrollo, proyecto IPR00C035
Control de la replicación cromosómica
en Escherichia
coli. MCT proyecto BMC2002-00830
La hiperestructura de replicación: Estructura
y función. Junta de Extremadura, proyecto 2PR04A036,
período diciembre 2004-diciembre 2007.
Grupo de investigación “Genética Molecular Bacteriana”,
Junta de Extremadura GRU07061, periodo 2007.
Función y localización de la hiperestructura de
replicación del DNA en E. coli. Junta de Extremadura, proyecto
PRI07-A001, periodo septiembre 2007 a septiembre 2008.
Estudio de la replicación en E. coli : La hiperestructura de
replicación y la replicación inducida por estrés
térmico. MEC, proyecto BFU2007-63942/BMC, periodo 2008-2010.
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Resumen
-
- En nuestros trabajos de investigación
abordamos el estudio de dos aspectos de la replicación
cromosómica en Escherichia coli.
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- 1. Inducción térmica de la
replicación.
- El estrés térmico activa un inicio
extra de replicación (heat induced replication o HIR) que inicia
en oriC, no requiere la actividad de la RNA polimerasa ni
síntesis de proteínas pero requiere DnaA, PriA y RecA y
para el inicio requiere el 13mero L. Los datos sugieren que esta
activación se debe a una activación estructural de la
secuencia oriC.
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- 2. La NDP reductasa en la
hiperestructura de
replicación.
- La inhibición de la NDPr por hidroxiurea
inhibe la elongación de la replicación mientras que el
mutante termosensible nrdA101
mantiene la replicación durante al menos 40 min a 42ºC.
Este tiempo de replicación a la temperatura
restrictiva se duplica en ausencia de la proteína Tus. Cuando se
eleva la temperatura en ausencia de síntesis de RNA o de
proteínas, todas las replicaciones terminan sin problema alguno,
lo que sugiere la síntesis de una proteasa que degradaría
la proteína parcialmente alterada por la temperatura pero
aún activa en la hiperestuctura de replicación.
La inactivación de la NDPr afecta también a la
segregación cromosómica y, como consecuencia, a la
división celular. Estos resultados sugieren que la
NDPR forma parte de una hiperestructura de replicación que se
organiza
exclusivamente en el inicio y que protege a la enzima de su
desnaturalización térmica. Esta hiperestructura
estaría constituida por el replisoma, complejo de
síntesis de dNTP, complejo de segregación
cromosómica, membrana y DNA.
La colocalización de la NDPr con DnaX y DnaB, mediante
inmunofluorescencia, demuestra la participación de la NDPr en la
hiperestructura de replicación.
-
- en rojo NDPr, en verde
DnaX
-
- Publicaciones
más
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